第16章 完美的PCR实验（2 / 4）
能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一dna片段，于几小时内扩增至十万乃至百万倍。
其原理基本与人体细胞内dna复制像似，但反应体系相对简单。
当然了，这不意味着pcr简单。
相反，pcr是非常难的.
首先通过高温“变性”，把一段双链结构的dna解链，变成两条单链结构dna。
之后“退火”，在低温下让“引物”和作为模板的dna互补结合，形成局部双链。
最后中火“延伸”，通过dna聚合酶催化以引物为起始点的dna链产生延伸反应，变成两条双链结构的dna。
接下来不断重复这个过程。
1变2，2变4，4变8，8变16，16变32……
通过pcr技术，可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的dna供分析研究和检测鉴定。
比如亲子鉴定；
比如疫苗研究；
比如病毒疾病防治；
又或者遗传病研究等等，都需要大量用到pcr。
当然，周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验，其实是没有必要做pcr的。
蚜虫是一种很低级的虫子，一般直接用药物作用在其身上，然后看它的遗传特性就行了。
之所以还要做pcr，更多的目的也是为了学习pcr。
pcr反应体系包含了水、缓冲液、dntp（脱氧核糖核苷三磷酸）、引物p1p2dna模板以及taq酶。
等一切都准备好之后，周文调节好提取枪的量程，然后提取30μl的水到三组pcr管里。
吸液的时候严格按照操作规程，垂直吸液、慢吸慢放。
换过枪头后，提取了5毫升的缓冲液到pcr管中。
再分别向管中加入dntpp1p2dna模板……
得益于这段时间的学习，除了一开始有些紧张外，周文做起来有条不紊。
等所需原料添加完毕后，接下来就是离心了。
按照要求设定好转速后，等了三分钟，离心完成。
周文从离心机里取出装着混合液的pcr管，立刻放到了pcr仪上，进行扩增。
设定94c预变性4min。
然后设定20次循环扩增阶段。
高温、低温、中温、高温……
1变2，2变4，4变8，8变16，16变32…… ↑返回顶部↑
其原理基本与人体细胞内dna复制像似，但反应体系相对简单。
当然了，这不意味着pcr简单。
相反，pcr是非常难的.
首先通过高温“变性”，把一段双链结构的dna解链，变成两条单链结构dna。
之后“退火”，在低温下让“引物”和作为模板的dna互补结合，形成局部双链。
最后中火“延伸”，通过dna聚合酶催化以引物为起始点的dna链产生延伸反应，变成两条双链结构的dna。
接下来不断重复这个过程。
1变2，2变4，4变8，8变16，16变32……
通过pcr技术，可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的dna供分析研究和检测鉴定。
比如亲子鉴定；
比如疫苗研究；
比如病毒疾病防治；
又或者遗传病研究等等，都需要大量用到pcr。
当然，周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验，其实是没有必要做pcr的。
蚜虫是一种很低级的虫子，一般直接用药物作用在其身上，然后看它的遗传特性就行了。
之所以还要做pcr，更多的目的也是为了学习pcr。
pcr反应体系包含了水、缓冲液、dntp（脱氧核糖核苷三磷酸）、引物p1p2dna模板以及taq酶。
等一切都准备好之后，周文调节好提取枪的量程，然后提取30μl的水到三组pcr管里。
吸液的时候严格按照操作规程，垂直吸液、慢吸慢放。
换过枪头后，提取了5毫升的缓冲液到pcr管中。
再分别向管中加入dntpp1p2dna模板……
得益于这段时间的学习，除了一开始有些紧张外，周文做起来有条不紊。
等所需原料添加完毕后，接下来就是离心了。
按照要求设定好转速后，等了三分钟，离心完成。
周文从离心机里取出装着混合液的pcr管，立刻放到了pcr仪上，进行扩增。
设定94c预变性4min。
然后设定20次循环扩增阶段。
高温、低温、中温、高温……
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